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在大肠杆菌中,cAMP-CAP(分解代谢物基因激活蛋白)作为全局性正调控因子,可同时促进多个糖代谢操纵子的转录。某突变菌株的 cap 基因发生无义突变,导致 CAP 蛋白完全失去功能。与野生型菌株在相同低葡萄糖培养基中培养相比,该突变菌株中乳糖操纵子转录水平的变化方向为____,这体现了 cAMP-CAP 在操纵子调控中的____(填“正调控”或“负调控”)作用。
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大肠杆菌色氨酸操纵子的衰减作用依赖于前导序列中不同区域间的互补配对。当细胞内色氨酸浓度较低时,核糖体在前导肽的两个色氨酸密码子处____(填“停滞”或“顺利通过”),使区域2与区域3配对,区域____无法与区域4配对形成终止茎环,RNA聚合酶得以继续转录结构基因;而当色氨酸浓度高时,核糖体顺利通过前导肽编码区,区域3与区域4配对形成终止结构,转录在衰减子处提前终止。
某tRNA的反密码子序列为5'-CGA-3'。根据密码子与反密码子之间的反向平行配对原则,该tRNA所识别的mRNA上的密码子应为5'-____-3'(用三个碱基字母表示);密码子与反密码子的这种配对关系体现了遗传密码具有____的特点。
在大肠杆菌核糖体中,肽键的形成并非由蛋白质催化,而是由核糖体大亚基中的____(填写具体RNA分子名称)所具有的肽基转移酶活性催化完成的,这一发现支持了核糖体本质上是“核酶”的观点。若某抗生素通过与核糖体50S亚基的肽基转移酶中心结合而阻断肽链延伸,则受影响的翻译阶段是____阶段。
某真核生物前体mRNA含外显子E1、E2、E3(依次排列)。剪接中,剪接体识别内含子5′剪接位点的保守二核苷酸____与3′剪接位点的AG,经两次转酯反应完成切除与连接。若经可变剪接跳过E2,则成熟mRNA中E1的3′端直接与____的5′端连接。
原核生物核糖体由大、小两个亚基组成,其中负责与mRNA结合并容纳其通过的小亚基沉降系数为____S,大亚基沉降系数为50S,二者组装成沉降系数为70S的完整核糖体,其功能是催化肽键形成并完成蛋白质的翻译。
原核生物中,RNA聚合酶全酶通过其σ因子识别启动子的特定序列并完成转录起始。大肠杆菌启动子的−35区共有序列为TTGACA,−10区共有序列为TATAAT。若某基因启动子的−35区序列突变为TTGCTA,与共有序列匹配度下降,则该突变最可能使RNA聚合酶与启动子的结合能力____,导致转录起始频率____。
大肠杆菌错配修复系统中,MutS负责____错配碱基对,MutH在半甲基化的GATC位点切开新合成链,随后由外切酶切除包含错配碱基的DNA片段并重新合成。该系统之所以能区分新合成链与亲代链,是因为亲代链上GATC位点的腺嘌呤已被____。若某菌株的Dam甲基化酶缺失,则修复系统将无法准确选择待切除的链,其后果是____。
λ噬菌体整合酶催化位点特异性重组时,重组发生在attP与attB两个位点之间,重组后产生两个新位点,分别称为____;与同源重组不同,该过程不需要RecA蛋白,也不依赖大范围的同源序列,只需附着位点两侧约____ bp的同源核心序列即可完成链交换。
DNA复制的高度保真性依赖于多重机制协同:DNA聚合酶对底物的严格选择、聚合酶3'→5'方向的____活性(可切除错配碱基),以及复制后的____修复系统。请填写这两个空。
某双链DNA分子中,整个分子碱基总数为1000个,其中胞嘧啶C共210个。根据DNA双螺旋碱基互补配对原则,该DNA分子中腺嘌呤A共有____个;由此可知A与G在全部碱基中所占的百分比之和为____%。
人类基因组计划的主要成果包括:测出人类基因组的全部核苷酸序列,总量约为____×10⁹碱基对;鉴定出的人类基因数量约为2万~2.5万个,远低于先前估计的10万个;同时绘制了遗传图、物理图、转录本(表达序列)图和____图四张图谱。
在基因工程中,能容纳大片段外源DNA(可达100~300 kb)并常用于构建基因组文库的克隆载体是____;而质粒载体的插入片段容量通常较小,一般不超过____ kb。
检测某基因表达水平时,先以mRNA为模板经____酶合成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增,此方法称为RT-PCR;若在扩增过程中实时监测荧光信号,以荧光强度达到可检测阈值时的循环数(即____值)作为定量指标,则称为实时定量PCR。与常规RT-PCR相比,实时定量PCR可对起始模板量进行____(填“定性”或“定量”)分析。
Sanger双脱氧链终止测序法中,ddNTP掺入延伸中的DNA链后,由于其脱氧核糖的____位缺少羟基,无法与下一个dNTP形成磷酸二酯键,导致链延伸终止。
在真核生物中,双链RNA被Dicer酶切割成小干扰RNA(siRNA),随后siRNA与Argonaute蛋白等组装成复合物____,该复合物中的____(链)通过碱基互补配对识别靶mRNA,引导其降解,从而在转录后水平抑制基因表达。
真核细胞中,具有转录活性的基因所在染色质通常呈现松散构象,对核酸酶DNase I敏感;这种开放结构常伴随组蛋白N末端尾部一种减弱组蛋白与DNA静电吸引、利于基因激活的共价修饰,该修饰是____(写中文名称)。
乳糖操纵子中,阻遏蛋白与操纵基因O结合阻遏转录,属于____调控;CAP-cAMP复合物结合启动子上游位点促进转录,属于____调控。
蛋白质翻译后加工与修饰是形成功能蛋白的关键步骤。肽链中两个半胱氨酸残基的巯基经氧化可形成____键,从而稳定蛋白质的空间构象;而发生在内质网腔中的N-连接糖基化,共价连接于天冬酰胺残基时,识别的糖基化序列为 Asn-____-Ser/Thr。
真核生物mRNA前体加工时,5'端加帽发生在转录起始后不久,新生的RNA 5'端三磷酸基团被加上一个7-甲基鸟苷,形成____结构;3'端加尾依赖于前体分子中位于断裂加尾位点上游的加尾信号序列AAUAAA,转录物被切断后由多聚腺苷酸聚合酶在其3'端逐个添加腺苷酸,形成____尾,该尾与5'端帽子共同协助成熟mRNA的稳定与翻译。